下面是某同学做自生固氮菌分离实验的方案和观察结果:
培养基成分:NaNO3:2g;K2HPO4:1g;KCl:0.5g;MgSO4:0.5g;FeSO4:0.01g;蔗糖:30g;琼脂:15g~20g;蒸馏水:1000mL。
A.实验目的:略。
B.实验材料和用具:略。
C.实验方法和步骤:
(1)接种:
①接种前,准备好上述配方的培养基,放入培养皿中并灭菌,供实验用。
②取10g土壤,放在无菌研钵中,注入5mL蒸馏水,并用无菌玻璃棒搅拌均匀,备用。
③将接种环放在酒精灯的火焰上灭菌。将培养皿盖轻轻放在桌面上,手拿培养皿。将接种环放在培养基边缘处冷却。然后,用接种环蘸取少许泥浆,轻轻地点接在培养基的表面上,共点接15~20处。
④接种后,轻轻地盖上培养皿盖,将培养皿放在实验桌上。
(2)培养:将接过种的培养皿放人恒温箱内,在28℃~30℃的温度下培养3d~4d。
(3)观察:3d~4d后,取出培养皿,仔细观察培养基上的菌落,其中大而扁、边缘呈现波状或锯齿状并为褐色的菌落为自生固氮菌。
(4)镜检:略。该实验方案和观察结果中有几处明显错误,请指出错误并改正。(至少找出三处)在线课程Ⅰ.培养基的配方中含有氮源是错误的,应将NaNO3改为不含N的钠盐;
Ⅱ.实验步骤接种②中用蒸馏水是错误的,应改为无菌水;
Ⅲ.实验步骤接种③中将培养皿盖放在桌面上是错误的,应改为略微打开培养皿盖;
Ⅳ.实验步骤接种④中没有写实验内容、接种人的姓名和接种日期,应在接种步骤④的后面加上“并在皿盖上写明实验内容、接种人的姓名和接种日期”;
Ⅴ.实验步骤观察中“仔细观察培养基上的茵落,其中大而扁、边缘呈现波状或锯齿状并为褐色的茵落”是错误的,应改为“仔细观察培养基上稀泥浆周围出现的黏液。黏液初为无色透明,以后为乳白色,最后变为褐色”。
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