(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有______个游离的磷酸基团。(2)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是___________。
(3)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入_______酶。
(4)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了____________。
(5)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在_________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。在线课程(1)0、2
(2)SmaⅠ会破坏质粒的抗药性基因外源DNA中的目的基因
(3)DNA连接酶
(4)鉴别和筛选含有目的基因的细胞
(5)蔗糖为唯一含碳营养物质