在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长，下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答问题。

（1）A过程至多需要的酶有______________种。

（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的三个条件是①_______________

_______________；②____________________________________；③____________________

_________________________。

（3）如果利用DNA分子杂交原理再生植株进行检测，D过程应该用________________

____________________________________________作为探针。

（4）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的转移符合孟德尔遗传规律。

①将转基因植株与____________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。

②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为_____________。

③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占___________________%。

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(1)限制性内切酶和DNA连接酶

　　(2)具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存；多个限制酶切点

　　(3)卡那霉素

(4)放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因

　　(5)①非转基因植株　②3∶1　③100

解析:

本题考查基因工程的操作过程与转基因作物后代遗传，属于考纲分析综合应用层次。解答本题的关键是明确基因工程的操作过程，并对转基因作物的后代遗传与孟德尔的基因分离定律相结合。A过程为目的基因与运载体相结合的过程，需要同一种限制性内切酶和DNA连接酶；B过程为目的基因导入受体细胞过程，目的基因是否导入受体细胞需检测标记基因，在培养过程中，质粒能进行复制并能稳定保存；C过程中加入卡那霉素对含卡那霉素抗性基因的细胞进行选择；D过程用含放射性同位素标记的抗虫基因做探针检验植株中是否含有抗虫基因；转基因植株相当于杂合子，与非转基因植株杂交，后代两种性状比例为1∶1，转基因植株自交，后代比例为3∶1，花药中含抗卡那霉素基因和不含抗卡那霉素基因的比例虽然为1∶1，但在卡那霉素的选择下，后代均为抗卡那霉素的植株。