３５. 回答有关“基因工程”方面的问题（共10分）

I．请分析下面一项专利：

申请专利号	03109739.1	专利申请日	2003.04.14
名称	利用转基因番茄生产胰岛素的方法	公开号	1458161
公开日	2003.11.26[	申请（专利权）	林忠平
地址	北京市北京大学生命科学学院	发明（设计）人	林忠平、倪挻、陈溪、胡雷
专利摘要	本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱密码子的原则来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端加上KDEL的内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解。将该基因置于CaMV35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。

（１）此基因工程中，目的基因是 。检测受体细胞中是否存在目的基因，方法有 。这项专利所依据的遗传学原理主要是 。

（２）重组时，在C端加上KDEL的内质网滞留序列的目的是 。

（３）为了防止目的基因通过花粉转移到其他植物，应该把目的基因导入受体细胞的

中。

II．下图描述的是上述利用转基因番茄获得产品的过程。已知限制酶a的识别序列和切点是—G^↓GATCC— ，限制酶b的识别序列和切点是—^↓GATC—。

（１）图中①的过程是______过程。

（２）图中②的过程，在基因工程中的步骤是________________。

（３）目的基因与农杆菌质粒重组过程中，对符合设计要求的质粒进行酶切。请画出农杆菌质粒被限制酶a切割后所形成的两个DNA片段末端碱基序列______________。

（４）目的基因导入细胞后要成功表达，需经历______和______两个过程。

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（1）人胰岛素基因；受体细胞中是否具有某些标记基因；碱基互补配对

（2）使合成的胰岛素在内质网中保存，以免被降解 （3）叶绿体或线粒体

（4）逆转录 （5）将重组DNA分子（重组质粒）导入受体细胞

（6）- G GATCC -

| 和 |

- CCTAC G -

（7）转录；翻译