香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜冻影响，对香蕉生长发育影响很大。由香蕉束顶病毒（BBTV，单链环状DNA病毒）引起的香蕉束顶病，对香蕉生产的危害十分严重。当前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段提高其种质水平，具有重要意义。

请根据上述材料，回答下列问题：（每小题2分，共10分）

（1）脱毒香蕉苗的获得，可采用__________的方法，此方法的依据是___________。

（2）建立可靠的BBTV检测方法可以监控脱毒香蕉苗的质量，请问可用哪些方法检测病毒的存在?（列举两种方法）

（3）在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值，如何通过转基因技术获得抗寒能力提高的香蕉植株?

（4）在运用转基因香蕉的过程中，在生态安全方面可能会出现什么问题? （列举两点）

（5）从细胞工程的角度出发，简述一种培育抗寒香蕉品种的方法及其依据。

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（1）茎尖（分生组织）组织培养：植物细胞全能性。

（2）①BBTV病毒基因的检测（DNA分子杂交技术）；②BBTV病毒蛋白的检测（获 得抗血清，利用抗原一抗体的杂交反应，判断病毒是否存在）。

（3）将抗冻蛋白基因插入土壤农杆菌的质粒，构建表达载体，通过农杆菌的转化导入香蕉受体细胞，成功转化的香蕉细胞通过组织培养形成植株。

（4）生态安全问题包括；①外源基因扩散到其他物种（外源基因漂移）；②转基因植株扩散影响生态系统的结构和功能；③转基因植株扩散对生物多样性的影响；④转基因植物残体或分泌物对环境的影响。

（5）体细胞杂交育种，其依据是将不同品种的香蕉体细胞利用细胞融合技术融合成杂种细胞后培育出抗寒香蕉品种（或体细胞诱变育种，其依据是利用诱变剂等方法使香蕉离体培养细胞发生基因突变，然后筛选培育出抗寒品

解析:

此题考查的是基因工程育种方法利用这一方法的常见的问题，属考纲综合运用层次。（1） 植物细胞具有全能性，且因为植物体内，病毒是通过维管系统而移动，但在分生组织中不存在维管系统。病毒在细胞间移动只能通过胞间连丝，速度很慢，难以赶上活跃生长的茎尖，因此可以用茎尖培养脱毒苗。（2）利用DNA分子杂交技术或病毒蛋白的检测均可检测病毒的存在。（3）利用基因工程，通过获取目的基因、形成重组基因、导入重组基因、检测表达这一系列过程可以成功转化所需的目的细胞，再通过组织培养技术得到所需的植株。（4）生态安全问题包括；①外源基因扩散到其他物种（外源基因漂移）；②转基因植株扩散影响生态系统的结构和功能；③转基因植株扩散对生物多样性的影响；④转基因植物残体或分泌物对环境的影响等。（5）体细胞杂交育种，其依据是将不同品种的香蕉体细胞利用细胞融合技术融合成杂种细胞后培育出抗寒香蕉品种（或体细胞诱变育种，其依据是利用诱变剂等方法使香蕉离体培养细胞发生基因突变，然后筛选培育出抗寒品种。