目前，加酶洗衣粉中的蛋白酶主要是中温蛋白酶，最适酶活温度在50°C左右，由于日常洗涤用水的温度达不到该温度，导致蛋白酶活性受到影响。适冷蛋白酶是从适冷鱼类体内分离纯化或由深海适冷菌分泌出的酶类，最适酶活温度在20°C左右，用其作为洗衣粉添加剂可在较低的温度下达到理想的洗涤效果。下图为分离可分泌蛋白酶的适冷菌的操作步骤，

据图回答问题：

（1）在将配制好的牛肉膏蛋白胨培养基分装到三角瓶中时，为避免培养基沾到瓶口，必须使用 进行分装，并及时进行 操作。

（2）将扩大培养后的深海微生物用 法接种到含酪蛋白的固体培养基表面，在适宜条件下培养一段时间，挑出形成透明圈的菌落，即为初选出的适冷菌。

（3）为进一步检测分离出的适冷菌分泌的适冷蛋白酶的最适酶活温度，将该菌按上图所示分7组进行培养，这7组实验问形成了 ， 组所对应的温度为最适酶活温度。

（4）由操作过程可知该适冷菌的代谢类型为 。

（5）若将分离到的适冷菌接种到一定容积的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，置于适宜条件下振荡培养，细菌数量将呈 增长，其环境容纳量主要取决于 。

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（每空2分，共16分）

（1）三角漏斗 无菌 （2）稀释涂布平板

（3）（相互）对照； 透明圈与菌落直径比值最大

（4）异养需氧型

（5）S型（逻辑斯谛增长）；营养物质的量（培养液体积和浓度）

解析:

本题以实验题形式，综合考查微生物学的相关知识，（1）用三角漏斗进行分装，可以避免培养基沾到瓶口，还要及时进行灭菌操作，以避免污染；（2）稀释涂布平板法接种一般用于微生物分离纯化；（3）实验的不同组之间形成对照，因为要选的是适冷菌分泌出来的蛋白酶，所以要选透明圈与菌落直径比值最大所对应的温度为酶的最适温度；（4）从题意：未密封和加有机碳源可知，该适冷菌的代谢类型为异养需氧型的；（5）一定条件下细菌的增长是S型增长，其环境容纳量主要取决于培养基的体积和提供的营养物质的量。<?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" />