科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功的实现了表达．从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。其过程大致如下图所示：(每空1分，共15分)

(1)基因工程的操作程序主要包括四个步骤是 、 、 、

。

(2)获取Bt毒蛋白基因的方法一般有 、 等．

(3)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T—DNA，把目的基因插入Ti质粒的T—DNA中是利用了T—DNA的 特点。Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为 。

(4)将目的基因导人受体细胞的方法很多，在该题中涉及到的方法是 。

(5)在基因工程操作过程中，其核心是 ，这需要 酶。一个基因表达载体的组成必须有 等。

(6)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是 ，这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是 。若从个体水平来怎样检测？ 。

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（1）目的基因的获取 基因表达载体的构建

将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与表达

（2）从基因文库中获取 直接合成

（3）可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA分子上 转化

（4）农杆菌转化法

（5）基因表达载体的构建 限制酶和DNA连接酶

启动子、终止子、目的基因和标记基因

（6）目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA分子上

DNA 分子杂交技术 抗虫的接种实验

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