．用来治疗糖尿病的胰岛素，过去主要靠从动物体器官、组织中提取，但因受原料限制，无法推广。现在，可以用发酵工程的方法来生产胰岛素。若用大肠杆菌发酵来生产胰岛素，并结合基因工程，写出其生产过程：

（1）构建转入人胰岛素基因的工程菌。

①提取目的基因：从人的胰岛细胞中获取 ，再用 法制备人的胰岛细胞目的基因。

②目的基因与运载体结合：从大肠杆菌的细胞中提取 ，并用 酶切割质粒，使其露出 。用同一种酶切割目的基因使其产生相同的 ，再将目的基因插人质粒切口处，加入适量的 酶，这样就形成了一个 由______________和 组成的重组DNA。

③将目的基因导人受体细胞：将大肠杆菌用 处理，以增大 的通透性，让重组DNA进人大肠杆菌体内。

④目的基因的检测和表达：在用一定的方法检测出目的基因已导人大肠杆菌细胞内，

并 后；再对该种大肠杆菌扩大培养。

（2）从概念上分析，这种基因重组与孟德尔基因自由组合所产生的基因重组有何不同?

(至少两个方面) __________________________________________ ________ _ _ __ _ 。

（3）有人提出“吃基因补基因”，你是否赞成这种观点，试从新陈代谢的角度简要说明理由 。

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（1）①人胰岛素基因mRNA；反转录②质粒 限制 黏性末端 黏性末端

DNA连接 人的胰岛素基因 大肠杆菌质粒 ③氯化钙 细胞壁 ④能表达

（2）①前者在体外进行，后者在体内发生； ②前者是定向变异，后者不是；

③前者导入外源基因，后者没有；④后者通过有性生殖实现，而前者不必（2分）

（3）开放性题目，只要学生用生物学知识说明，就可以给分。（如：不赞成，因为 基因被吃入后，和其他生物大分子物质一样被消化分解，不可能以原状进入细胞，更不可能补充或整合到人体原有的基因组中去。赞成：基因被吃下后，消化分解为简单物质，可以作为DNA的原料）。