现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性,并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列实验报告并回答有关问题。
Ⅰ.实验原理: 。
根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。
Ⅱ.实验材料:活的小白鼠胚胎。
Ⅲ.药品用具:胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜
Ⅳ.实验步骤
(1)制备细胞悬浮液
把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养
①取A、B、C三个洁净的培养瓶, 。
②向A培养瓶中加入化学物质甲,向B培养瓶中加入等量的化学物质乙,并将培养瓶摇匀。
③向C瓶内 。
(3)制作临时装片
①当细胞增殖到大约第8代左右时,同时从恒温箱中取出三个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,使培养的细胞从瓶壁上脱落,再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞。
②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央, ,3~5 min后,盖上盖玻片。
(4)镜检和统计
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于 期的细胞,并与
对比以确认发生变异的细胞,同时统计该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。
Ⅴ.结果与结论
经研究人员实验得知:A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%、QB=12.5%、QC=0.1%,由此可知该实验的结论是 。
Ⅵ.回答问题
在实验中,C培养瓶起什么作用? 。
在线课程Ⅰ.有毒物质能诱导细胞产生变异
Ⅳ.(2)①消毒灭菌,加入等量的细胞悬浮液
③加入等量生理盐水,并摇匀。
(3)②用适宜浓度龙胆紫溶液染色
(4)细胞有丝分裂中 C组
Ⅴ.甲、乙都是有毒性的,且乙的毒性大于甲
Ⅵ.对照
解析:
本题主要是通过细胞培养来考查实验设计。有毒物质会引起细胞染色体的变异,在细胞培养液中加入待测物质,通过观察细胞是否发生变异以及变异细胞的数量来检测待测物质是否有毒。设计实验时需要遵循单一变量原则、等量原则和对照原则,同时需要对题干内容前后联系来看,根据研究人员的实验结果可知A组和B组为实验组,C为对照组,并不是任意设置的;首先应向三组加入等量的已制备的细胞悬浮液;设置对照时应向C组加入等量的生理盐水;鉴定是否发生染色体变异时需要通过显微镜来镜检,需要制作装片同时要对染色体进行龙胆紫染色;观察染色体的最佳时期是有丝分裂的分裂中期。