从土壤中分离自生固氮菌到制成临时装片的步骤是（ ）

A.观察→培养→接种→涂片 B.接种→观察→培养→涂片

C.培养→接种→观察→涂片 D.接种→培养→观察→涂片

D

步骤是将表土制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养，注意观察菌落的颜色变化，呈褐色时，制作临时涂片进行镜检。