继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：

⑴、获得目的基因的方法通常包括PCR技术和 。

⑵、获得目的基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处，

DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”）

⑶、进行基因转移时，通常要将外源基因转入 （细胞）中，原因是

⑷、由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率 ，所以在转化后通常需要进行 操作。