【生物一现代生物科技专题】

国家863计划项目“利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用蛋白”取得重大进展。目前，已经成功获得经纯化的抗凝血酶III蛋白，达到国际先进水平。下面是制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程图：

（1）根据流程图分析，动物乳腺生物反应器主要利用了_____技术、胚胎工程技术和细胞培养技术。

（2）要实现①超数排卵，应在崂山奶山羊A发情周期的某一阶段用______处理，然后在恰当时期进行 收集卵子。通过②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是____________________________________________________________

（3）过程④需将抗凝血酶III基因注入受精卵的雄原核内，在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是________________________。

（4）要使人的抗凝血酶III基因在山羊乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、__________、标记基因等部分。在⑤之前要检测早期胚胎细胞是否已经导人抗凝血酶III基因，宜采用_________________技术

（5）若要一次获得多只完全相同的转基因崂山奶山羊D，⑤应采用_____________技术。

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（1）转基因（DNA重组）

（2）促性腺激素 冲卵 粗子没有获能

（3）在卵黄膜和透明带的间隙观察到两个极体

（4）启动子、终止子 DNA分子杂交

（5）胚胎分割移植

解析:

考查基因工程、胚胎工程有关的知识。

（1）从图解中可以看出，体外受精、胚胎移植、重组DNA技术，涉及到大技术手段有基因工程、胚胎工程和细胞培养技术等。

（2）体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等几个主要步骤，卵细胞的采集方法：用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。

（3）精子入卵后形成一个雄原核，与此同时，精子入卵后被激活的卵子完成减数第二次分裂，排出第二极体后形成雌原核，并在在卵黄膜和透明带的间隙观察到两个极体；

（4）基因表达载体包括目的基因、标记基因、启动子、终止子等部分，目的基因的检测方法是DNA杂交技术，其次是检测目的基因是否转录出了mRNA。