依据基因工程技术和细胞工程有关原理回答下列问题：

（1）基因工程操作的基本步骤是：

a　　　　 　　　　　；

b 　　　　　　　 　　　　；

c 　　　　　　　 　　　　；

d 　　　　　　　　 　　　。

（2）获取目的基因途径有　　　　　　　　　　　　、　　　　　　　　　　　　。

（3）下图是将人类的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图，所用的载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒导入细菌B后，其上的基因能得到表达。简述重组质粒的主要过程包括：

① ；

② ；

③ 。

④导入细菌B细胞的目的基因成功表达的标志是什么？ 。

（1）获取目的基因　 构建基因表达载体　 将目的基因导入受体细胞　 目的基因的检测与鉴定 （2）直接分离 人工合成 （3）①用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个有粘性末端的切口 ②用同种限制酶切割目的基因，产生相同的粘性末端 ③将切下的目的基因片段插入到质粒的切口处，再加入适量的DNA连接酶，使质粒与目的基因结合成重组质粒 ④受体细胞合成人的生长激素