)运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现:
用人体细胞与小鼠体细胞进行杂交得到的杂种细胞含有双方的染
色体。杂种细胞在持续分裂过程中保留鼠的染色体而人类染色体则
会逐渐丢失,最后只剩一条或几条。右图表示人的缺乏HGPRT酶突
变细胞株(HGPRT-)和小鼠的缺乏TK酶细胞株(TK-)融合 后并在HAT
培养液中培养的过程,结果表明最终人的染色体在融合细胞中仅存有
3号染色体或17号染色体或两者都有。已知只有同时具有HGPRT
酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖。
(1)体细胞杂交克服了 ,过程①常用的生物方法是
。
(2)过程②中,为了防止细菌的污染,所用培养液应该添加一定量的 ,
此外还要定期用 处理细胞,使贴壁生长的细胞脱落形成细胞悬液。
(3)从培养过程看,HAT培养液不仅能提供养料,还起 作用。
(4)从图示结果看,可以确定人的 基因位于 号染色体;该方法可以对鼠基因定位吗? 。
在线课程(1)远源杂交不亲和(或生殖隔离)的障碍(1分) 用灭活的(仙台/动物)病毒诱导融合(1分)
(2)抗生素(1分) 胰蛋白酶(1分) (3)选择(筛选)(1分) (4) TK酶(2分) 17(2分) 不能(2分)
解析:
(1)体细胞杂交克服的是远源杂交不亲和(生殖隔离)的障碍。动物细胞融合常用灭活的动物病毒实现两动物细胞的融合。
(2)抗生素能够抑制细菌的生长与繁殖。培养的动物细胞每隔一段时间要用胰蛋白酶处理,使贴壁培养的细胞分散、防止出现接触抑制。
(3)根据只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖可知,HAT培养基既能为培养的细胞提供营养,又能起到选择(筛选)作用。
(4)融合细胞只含人的3号染色体不能存活,说明人的3号染色体上不含TK酶基因;融合细胞在含人的3号和7号染色体或只含人的7号染色体时就可以存活,说明人的7号染色体上含TK酶基因。
由于融合细胞具有鼠细胞的2个染色体组,不能确定TK基因在哪条染色体上,故不能用该方法对鼠基因定位。