科学家从预期人的生长激素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了双链DNA片段，获得双链DNA。科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。据图回答：
(1)建构基因表达载体时，必须有启动子、目的基因、终止子以及 。
（2）为便于重组和筛选，图中的目的基因需用 切割，质粒需用 切割。
(3)将基因表达载体导入细菌B之前，要将细菌B放入一定浓度的CaCl2溶液中处理，使之成为
的细菌。
(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，说明已导入了
，反之则没有导入。
（5）上述制备人的生长激素，运用的现代生物工程技术是 。
在线课程（1）标记基因 （2）限制酶Ⅱ 限制酶Ⅰ（3）感受态 （4）质粒或重组质粒（缺一不得分） （5）蛋白质工程（答基因工程不得分）