（09上海十四校联考）（10分）许多微生物在工业中有广泛的应用，如利用谷氨酸棒杆菌生产谷氨酸，谷氨酸是生产味精和食品添加剂的重要原料。利用酵母菌发酵制酒。请依据下列要求完成问题：

（一）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌。

1．诱变及筛选过程如下：

步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。

步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意添加 和调低 ，加琼脂后灭菌，制成固体平板。

步骤3：将紫外照射后的菌液稀释涂布平板，目的是 。

步骤4：依据 筛选出突变菌。

2．利用获得的突变菌和蔗汗进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵还有哪些可行方法？请选择：（ ）

①利用突变菌的耐酸特性，降低培养基的pH值，达到抑菌的目的；

②利用突变菌的耐高糖特性，通过高渗环境达到抑菌目的；

③保持厌氧环境，达到抑菌目的；

④在培养基中添加一些抑制物如特殊的抗生素，达到抑菌目的。

A．①②③④ B．①②③ C．①②④ D．①②

（二）某同学设计了下列实验步骤，测定谷氨酸发酵中谷氨酸棒杆菌生长所需的最适pH值。实验步骤：

①配制适宜的培养基分装到5个锥形瓶中；

②用pH缓冲液分别调节pH为4.0、4.5、5.0、5.5、6.0，分别标号A、B、C、D、E

③将每瓶培养基等量分装到3支试管中，加棉塞并包扎，每捆试管外挂上相应的标签；

④在酒精灯上加热煮沸10分钟灭菌；

⑤在无菌条件下接种等量菌种；

⑥在37℃恒温箱中培养24小时；

⑦测定每只试管中谷氨酸产量，并记录、统计、分析结果。

（1）上述 步骤中有3个明显的科学性错误，请指出，并按次序加以修正。

① ；

② ；

③ ．

设计一张表格，以统计实验结果。

答案：

（一）1. 添加高浓度蔗糖（葡萄糖）；调低pH值；获得单菌落：是否能在选择培养基上生长。 2. A

（二）（1）②用PH缓冲液分别调节pH为4.0、4.5、5.0、5.5、6.0，①改正：6.5、7.0、7.5、8.0、8.5；

④在酒精灯上加热煮沸10分钟灭菌； ②改正：在98Kpa高压下蒸汽灭菌20分钟；

⑦测定每只试管中谷氨酸产量，③改正：测定菌体的细胞数目或测重量（干重或湿重）。

（2）