（09宝鸡市质检）（16分）基因工程中，需使用的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是―G↓GATCC―，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是―↓GATC―。
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（1）根据已知条件和图回答：
① 上述质粒用限制酶 切割，目的基因用限制酶 切割。
② 将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，还要加入适量的 。
③ 请指出质粒上至少要有一个标记基因的理由： 。
（2）不同生物的基因可以拼接的结构基础是 。
（3）细菌基因与酵母菌基因的结构不同之处是 。
（4）大肠杆菌是首先成功表达外源基因的宿主菌，但不能表达结构复杂的蛋白质，哺乳类细胞、昆虫细胞表达系统虽然能表达结构复杂的哺乳类细胞蛋白，但操作复杂，表达水平低，不易推广使用。基因工程中常选用酵母菌作为受体细胞，请从细胞结构等方面分析用酵母菌作受体细胞能克服上述不足的理由： 。
在线课程答案：
（1）①Ⅰ Ⅱ ② DNA连接酶 ③检测重组质粒（或目的基因）是否导入受体细胞
（2）DNA结构基本相同（其他合理答案均可）
（3）细菌基因编码区是连续的
（4）①单细胞真核生物，含有加工、修饰蛋白质的内质网和高尔基体；②繁殖速度快，能很快得到大量的目的基因；③培养成本低；④容易培养。