(07广东五市联考)(生物技术实践,15分)
红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成,血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题:
(1)血红蛋白的提取和分离一般可分为四步: 、 、 和 。
(2)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。
① 加入柠檬酸钠的目的是 。
②以上所述的过程即是样品处理,它包括、 、 、透析。
(3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析,这就是样品的粗分离。
① 透析的目的是
②透析的原理是
(4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
样品纯化的目的是。
(5)提取细胞膜经常使用的材料是哺乳动物的成熟红细胞,原因是: 。(2分)
在线课程(1)样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定
(2)①防止血液的凝固②红细胞的洗涤 血红蛋白的释放 分离血红蛋白溶液
(3)①将样品中分子量较小的杂质蛋白除去②透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内
(4)通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去
(5)因为哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核、没有线粒体等由膜系统构成的细胞器,这样提取的细胞膜相对较纯。