阅读下列材料,然后回答相关问题:
功能克隆是根据基因的产物来克隆目的基因。例如镰刀型细胞贫血症,是血红蛋白分子中β—珠蛋白的某氨基酸改变造成的,根据这种变异的β—珠蛋白的氨基酸序列设计核苷酸片段,人工合成此片段作为基因探针,筛选病人有核红细胞的cDNA (由mRNA 反转录产生的DNA)文库,得到变异β—珠蛋白基因的cDNA,与正常人的cDNA 进行比较,确认镰刀型细胞贫血症的致病基因,进而克隆该致病基因。
(1)利用功能克隆技术克隆目的基因,首先要分离纯化特定的蛋白质。从红细胞中释放出血红蛋自常用的方法是 ,纯化蛋白质常用的方法是 。
(2)根据变异的β—珠蛋白的氨基酸序列设计核苷酸片段的过程是 。
(3)基因探针是指 。功能克隆过程中,人工合成的基因探针与目的基因的碱基序列常常不能完全互补吻合,最可能原因是 ,为提高基因探针的灵敏度,应选择 (较长、较短)的基因探针用于DNA 分子杂交。
在线课程(1)将红细胞放在蒸馏水中吸水胀破 凝胶色谱法(或电泳、透析法、离心沉降法)
(2)根据变异的β—珠蛋白的氨基酸序列,推测mRNA 的碱基序列,再根据mRNA 的碱基序列设计核苷酸片段
(3)放射性同位素(荧光物质)标记的DNA片段(脱氧核苷酸链)
一种氨基酸可能有几个密码子(或密码的简并、真核生物基因含有内含子等合理答案)较短