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大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列位于该质粒的lacZ基因中.lacZ基因中如果没有插入外源基因.lacZ基因便可表达出b半乳糖苷酶.如果培养基中含有IPTG和X-gal.X-gal便会被

编辑:chaxungu时间:2026-05-02 05:56:30分类:高中生物题库

大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出b半乳糖苷酶。如果培养基中含有IPTG和X-gal,X-gal便会被b半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达b半乳糖苷酶,培养基中X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题:

(1)作为受体大肠杆菌应__________________________,以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用__________处理过的受体大肠杆菌,置于试管Ⅱ中,并加入在试管Ⅰ中制备好的DNA。

(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入____________________等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。

(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果:

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(1)不含氨苄青霉素抗性基因(或对氨苄青霉素敏感) Ca2+

(2)IPTG、X-gal、氨苄青霉素

(3)①如果长出白色菌落,说明重组质粒已导入受体大肠杆菌

②如果未长出菌落,说明重组质粒未导入受体大肠杆菌

③如果长出蓝色菌落,说明自连的运载体pUC118质粒已转入受体大肠杆菌,但目的基因没有接入运载体

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