（9分）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：

（1）A过程需要的酶有___________________ ________。

（2）要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用 处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为 态；然后将 在缓冲液中混合培养完成转化过程。

（3）含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过[C] 和[E] 。如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在C过程的培养基中加入 。

（4）如想利用分子杂交技术检测再生植株中的抗虫基因是否转录，应该用放射性同位素标记的目的基因作为探针与___________杂交。

（1）(同一种)限制酶、DNA连接酶(2分)

（2）Ca²⁺ 感受 将重组质粒和感受态细胞

（3）脱分化、再分化 卡那霉素

（4）mRNA