干扰素具有高效干扰病毒增殖的作用,为获得大量的干扰素用于制药,科学家把人的干扰素基因导入家蚕细胞中,并得到高效的表达。
(1)进行转基因操作前,需用___________酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。
(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间;在导入目的基因时,通常采用____________________技术;若要检测干扰素基因是否导入家蚕细胞中,可以采用的分子水平的方法有 、 。
(3)通过PCR技术可大量获取目的基因。PCR反应体系主要包括:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。
(4)培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以_________________,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。
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(1)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)
(2)启动子; 终止子; 显微注射 DNA分子杂交技术; 抗原-抗体杂交技术(符合题意即可)
(3)TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶); 与干扰素基因两3’端特异性配对的引物
(4)增大细胞贴壁生长的附着面积