回答下列有关基因工程和克隆技术的问题。（10分）

2006年12月22日，我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

63、说出绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程中用到了哪些生物工程技术？ 　

利用了哪些原理？ （本题答案从下列所给选项中选择填写）

①转基因技术；②细胞核移植技术；③胚胎移植技术；④干细胞技术；⑤动物细胞培养技术

⑥基因突变；⑦基因重组；⑧动物细胞核具有全能性；⑨动物细胞具有全能性

64、过程①②中必需用到的酶分别是 和 。绿色荧光蛋白基因之所以能与质粒重组，原因是 。

65、早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及 等物质。

通过上图中过程①的方法获取目的基因的数量是有限的，要获得大量的绿色荧光蛋白基因可以利用PCR技术。PCR扩增反应（如下图所示）中加入的TaqDNA聚合酶能在接近沸点的条件下，发挥延伸DNA子链的作用，将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上。请回答：

PCR（DNA聚合酶链式反应）技术示意图：

	PCR（DNA聚合酶链式反应）技术示意图

66、你认为TaqDNA聚合酶一定是从下列哪种生物体细胞中分离提取的？

A．水母细胞 B．猪胎儿成纤维细胞 　C．极端嗜热菌 D．大肠杆菌

67、下面的表达式不能反映TaqDNA聚合酶的功能，为什么？ 。

68、用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点和标出碱基对数。（2分）

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63． ①②③⑤ ⑦⑧ 64. 限制性核酸内切酶（限制酶） DNA连接酶

该基因和质粒的化学成分都是DNA，都是双螺旋的空间结构、化学组成相同；有互补的碱基序列(答出其中一点即可)； 65.血清 66.C

67. TaqDNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上（不是连接磷酸二酯键）

68. 2分（标出图中位置，标出相对应碱基对数）