回答下列有关微生物和生物工程的问题。

基因克隆是对分离出来的目的基因进行大量扩增的过程。经过基因克隆，可以生产出大量的目的基因或在基因表达时获得大量的蛋白质。细菌质粒是基因克隆的合适载体，经研究发现，某些细菌质粒中含有两个抗生素抗性基因——氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，而且，在四环素抗性基因中存在限制酶的单一识别序列。

下图表示利用质粒进行基因克隆的过程，其中A-D表示物质，I和II表示抗性基因，①—⑦表示过程，其它数字表示菌落，据图回答下列问题。

48. 写出下列字母和编号的名称：

A： ； D： ；II： ；

49. 将A和B形成D所需的酶是___________ 。过程⑤表示 。

50. 为筛选含有物质A的细菌，需进行细菌培养，先在培养基（一）中只加入氨苄青霉素，一段时间后，培养基上长出的细菌菌落具有 特性。然后，用灭菌绒布从培养基（一）中蘸取菌种，再按到只含四环素的培养基（二）中培养。根据培养基（一）和（二）上的细菌生长情况，可以判断图中菌落_________（填数字）即为筛选出的含有物质A的细菌，原因是 （2分）。

51. 上述培养基从功能上属于 培养基。配制培养基时，在各成分都溶化后分装前，要进行的依次是 和 ，培养基配制后采用高压蒸汽灭菌的原因是_________________________。

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48． 目的基因　　　　　 重组质粒　　　　　　氨苄青霉素抗性基因

49． 限制酶和DNA连接酶 　　　将重组质粒导入受体细胞

50．抗氨苄青霉素 　 　3、5　 　　由于目的基因破坏了四环素抗性基因，使受体细胞不能在含有四环素的培养基上生长，所以该菌落就是筛选的含有目的基因的菌落（2分）

51．　 选择 　　 定容　　　 调pH值 　　　杀灭细菌芽孢