已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断,人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞尽管没有S途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,获得杂交瘤细胞,请回答:
(1)试管中除融合的杂交瘤细胞外,还有_____________种融合细胞。
(2)设计一方法(不考虑机械方法),从培养液中分离出杂交瘤细胞,并说明原理。
方法:_____________________________________________________________________。
原理:_____________________________________________________________________。
(3)将分离出的杂种细胞在不同的条件下继续培养,获得A、B、C三细胞株,各细胞株内含有的人染色体如下表所示(“+”有,“-”无)
| 细胞株 | 人染色体编号 | |||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | |
| A株 | + | + | + | + | - | - | - | - |
| B株 | + | + | - | - | + | + | - | - |
| C株 | + | - | + | - | + | - | + | - |
测定各细胞株内人体所具有的5种酶的活性,结果是:①B株有a酶活性;②A、B、C株均有b酶活性;③A、B株有c酶活性;④c株有d酶活性;⑤A、B、C株均无e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因影响,则支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的______、_______、_______、_______和_______号染色体上。
在线课程(1)2;(2)培养液中加入氨基嘌呤,收集增殖的细胞;加入氨基嘌呤后,使D合成途径阻断,仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖,但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。(3)6;1;2;7;8。
(1)试管中有人的淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞,在促溶剂的作用下,可能出现以下3种细胞的融合情况,人的淋巴细胞和淋巴细胞融合,小鼠的骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合,人的淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞融合,实验需要的是第3种细胞,即杂交瘤细胞;(2)要将杂交瘤细胞分离出来,可以在培养液中加入氨基嘌呤,收集增殖的细胞;加入氨基嘌呤后,使D合成途径阻断,仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖,但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。(3)B株有a酶活性,通过表格可以看出B株有6号染色体而A、C株没有,说明控制a酶活性的基因位于6号染色体上。控制其它酶的基因所在的染色体位置以此类推。