已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断,人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞尽管没有S途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,获得杂交瘤细胞,请回答:
(1)试管中除融合的杂交瘤细胞外,还有_____________种融合细胞。
(2)设计一方法(不考虑机械方法),从培养液中分离出杂交瘤细胞,并说明原理。
方法:_____________________________________________________________________。
原理:_____________________________________________________________________。
(3)将分离出的杂种细胞在不同的条件下继续培养,获得A、B、C三细胞株,各细胞株内含有的人染色体如下表所示(“+”有,“-”无)
| 细胞株 | 人染色体编号 | |||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | |
| A株 | + | + | + | + | - | - | - | - |
| B株 | + | + | - | - | + | + | - | - |
| C株 | + | - | + | - | + | - | + | - |
测定各细胞株内人体所具有的5种酶的活性,结果是:①B株有a酶活性;②A、B、C株均有b酶活性;③A、B株有c酶活性;④c株有d酶活性;⑤A、B、C株均无e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因影响,则支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的______、_______、_______、_______和_______号染色体上。
(1)逆转录 (2)限制性内切酶 DNA连接酶(两空可以互换) (3)增殖、分化(4)细胞融合 杂交瘤细胞 (5)A蛋白 核酸序列(或基因序列或RNA序列或核糖核苷酸序列) 抗A蛋白的单克隆抗体
本题综合考查基因工程和细胞工程的相关知识。同学们仔细分析题干图解,过程①是由RNA合成DNA,是逆转录过程;在获得A基因重组载体时,要用到限制性内切酶和DNA连接酶;过程⑥是由B细胞增殖、分化成效应B细胞;过程⑦是动物细胞融合的过程,获得的X是杂交瘤细胞;免疫预防是注射含有利用基因工程制备的A蛋白的疫苗,获得相应抗体,利用与已知病毒进行核酸序列比较的方法可以确定疑似患者体内分离出病毒的种类,也可以选用抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测上述病毒的种类。