下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamH Ⅰ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。

据图回答:
(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用__________________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含______的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是______(填字母代号)。
A.启动子 B.tetR C.复制原点 D.ampR
(3)过程①可采用的操作方法是______(填字母代号)。
A.农杆菌转化 B.大肠杆菌转化
C.显微注射 D.细胞融合
(4)过程②采用的生物技术是________________。
(5)对早期胚胎进行切割,经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的______性。
(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用______(填字母代号)技术。
A.核酸分子杂交 B.基因序列分析
C.抗原—抗体杂交 D.PCR
在线课程(1)Hind Ⅲ和BamHⅠ 氨苄青霉素 (2)A (3)C (4)胚胎移植技术 (5)全能 (6)C
(1)由图示可知:需用Hind Ⅲ和BamHⅠ限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因,因酶切后tetR四环素抗性基因结构被破坏而ampR结构完好,故用含氨苄青霉素的选择培养基可筛选含有重组载体的大肠杆菌。(2)启动子是一段特殊的DNA序列,是RNA聚合酶识别和结合的位点,可调控基因的特异性表达。(3)过程①表示把重组载体导入受体细胞的过程,当受体细胞为动物细胞时,常采用显微注射法。(4)过程②表示把早期胚胎移植到代孕母牛子宫的过程,属于胚胎移植技术。(5)经过程②得到新个体是细胞全能性的体现。(6)人乳铁蛋白基因是否成功表达,关键看是否有其表达产物即人乳铁蛋白,可用抗原—抗体杂交法检测该蛋白是否存在。