氯苯化合物是重要的有机化工原料,因其不易降解,会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1。

图1
表1 培养基的组成
| 液体培养基 | 蛋白胨 | 牛肉膏 | 氯苯 | 氯化钠 | 硝酸铵 | 无机盐(无碳) | 蒸馏水 |
| Ⅰ号 | 10 g | 5 g | 5 mg | 5 g | — | — | 1L |
| Ⅱ号 | — | — | 50 mg | 5 g | 3 g | 适量 | 1L |
| Ⅲ号 | — | — | 20~80 mg | 5 g | 3 g | 适量 | 1L |
(1)配制Ⅱ号固体培养基时,除添加Ⅱ号液体培养基成分外,还应添加1%的________。
(2)培养基配制时,灭菌与调pH的先后顺序是____________
________________________________________________________________________。
(3)从用途上来说,Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于______培养基和________培养基。在Ⅱ号培养基中,为SP1菌提供氮源的成分是________。
(4)在营养缺乏或环境恶劣时,SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体,这种休眠体,被称为________。
(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养,得到生长曲线(如图2)。从图2可知,SP1菌在________培养条件下最早停止生长,其原因是_________________。

图2
在线课程(1)琼脂 (2)先调pH,后灭菌 (3)通用 选择
硝酸铵 (4)芽孢 (5)20 mg/L氯苯 碳源最早耗尽
配制固体培养基时应在液体培养基的成分中再加入琼脂作为凝固剂。在配制培养基时应先调节pH,后进行灭菌,防止灭菌后在调节pH的过程中污染培养基。据表可知,培养基Ⅰ为牛肉膏蛋白胨培养基,包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子,适用于多种微生物的培养。培养基Ⅱ不加牛肉膏和蛋白胨,以硝酸铵为氮源,可以选择出以硝酸铵为氮源的微生物,是选择培养基。在营养缺乏、环境恶劣时,微生物可以形成休眠体—芽孢,来度过不良环境。据图2可知,SP1菌在20 mg/L氯苯培养条件下菌体数最早达到最大值,即最早停止生长,原因是在培养基Ⅲ中,氯苯是唯一碳源,由于20 mg/L氯苯培养条件氮源最少,因此也最早被耗尽,使SP1菌停止生长。