Ⅰ.（14分）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。

据图回答：

（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用　　　　　 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含　　　　　 的培养基上进行。

（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是　　　 （填字母代号）。

A.启动子　 B. tet^R　 C.复制原点　　 D. amp^R

（3）过程①可采用的操作方法是　　　 （填字母代号）。

A.农杆菌转化　　 B. 大肠杆菌转化　　 C.显微注射　　 D. 细胞融合

（4）过程②可采用的生物技术是　　　　　 。

（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的　　　 性

（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用　　　 （填字母代号）技术。

A.核酸分子杂交　　 B. 基因序列分析　　 C.抗原—抗体杂交　　 D. PCR

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（1） HindⅢ和BamHⅠ；氨苄青霉素

（2） A

（3） C

（4） 胚胎移植技术

（5） 全能

（6） C

思路分析：I（1）据图，仅将人乳铁蛋白基因切割出来，需要在人乳铁蛋白基因的左侧用BanHI切割，右侧用HindIII切割。当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后，TET^R基因被人乳铁蛋白基因隔开，不是完整的，而anp^R基因是完整的，所以筛选含有重组载体的大肠肝菌首先需要字含氨苄青霉素的培养基上进行。

（2）基因表达的调控序列在启动子上。

（3）将重组质粒导入动物细胞，常采用显微镜的方法。

（4）过程②的左侧是早期胚胎，右侧是代孕牛，过程②采用的生物技术是胚胎移植。

（5）将细胞培养为个体，利用了细胞的全能性。

（6）检测目的基因在手提细胞中是否表达，常采用抗原-抗体杂交技术。