蛋白质分子中,氨基酸的α-氨基和α-羧基虽然大部分都能结合形成肽键,但是蛋白质分子内仍含有各种酸性基团和碱性基团,如肽链末端的α-氨基和α-羧基、天冬氨酸和谷氨酸残基中的羧基、赖氨酸和组氨酸残基中的各种碱性基团,所以蛋白质是两性电解质。在酸性溶液中,碱性基团的解离程度增大,使蛋白质带正电荷;在碱性溶液中,酸性基团的解离程度加强,使蛋白质带负电荷。当溶液到达某一pH时,蛋白质可因内部酸性或碱性基团的解离程度相等而呈等电状态,这时溶液的pH叫做蛋白质的等电点。不处于等电点状态的蛋白质分子的正、负电荷量是不相同的。试回答下列问题。
(1)多数蛋白质的等电点近于5,一般含碱性基团较多的蛋白质的等电点________(“偏高”还是“偏低”)。
(2)根据等电点的不同,你能用________方法将不同种类的蛋白质分子分开。
(3)简述根据等电点分离不同种类的蛋白质分子的原理。
在线课程(1)偏高 (2)电泳 (3)调节电泳槽中缓冲液的pH,使某种蛋白质处于等电点状态,而其他蛋白质带有电荷,在电场作用下,带有正、负电荷的蛋白质分别移向两极,而不带电荷的蛋白质留在原处。
本题深入到蛋白质内部,从蛋白质分子带电性质及数量的深度引导学生理解电泳法分离蛋白质的原理。含碱性基团较多的蛋白质溶液,在pH近于5时解离程度较大,蛋白质带正电荷。要使蛋白质内部酸性和碱性基团解离程度相等呈等电状态,必须提高溶液的pH,使酸性基团解离程度增大,故蛋白质的等电点提高。根据等电点不同,可以利用电泳法将特定的蛋白质分离出来。