(1)PCR(聚合酶链式反应)技术在生物工程中相当重要。请简述PCR扩增目的基因的基本过程。______________________________。

(2)制备培养基方法：将蛋白胨、NaCl和牛肉膏放入烧杯内，加200 mL蒸馏水，用玻璃棒搅匀后，在酒精灯上加热。当蛋白胨、牛肉膏溶化后，加入琼脂，用微火继续加热至琼脂熔化，补充水至200 mL。用0.1 mol/L的NaOH或0.1 mol/L的HCl将pH调至7.0～7.2，分别对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌。当培养基的温度下降到50 ℃时，将其分装在5套培养皿中，在酒精灯火焰附近倒平板，当培养基冷却至室温，按下表分别进行处理。将处理完毕的培养基置于35 ℃的温度下培养2～3天，观察每个培养基中的细菌生长情况。请回答下列问题：

第1套	开盖，在空气中暴露10 s
第2套	用手指接触培养基约10 s
第3套	用硬币接触培养基约10 s
第4套	用滤纸擦一下课桌，再接触培养基约10 s
第5套	(不打开盖)

①上述实验中有哪些是无菌操作______________。

②第5套培养皿的作用是________。如果其培养基表面有菌落生长，说明___________________。

③在1到4套的培养基中都出现了不同形态的菌落，原因是____________。

能否说菌落的形态越多，用来接触的物体吸附的细菌数目就越多，为什么？

________________。

④实验中，有三处特别强调温度控制，请简要说明其控制温度的科学道理。

高压蒸汽灭菌后“培养基的温度下降到50 ℃时”才倒平板： ___________。

“当培养基冷却至室温，按下表分别进行处理”：____________________。

“将处理完毕的培养基置于35 ℃的温度下培养”：_____________________________。

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(1)目的基因DNA受热变性成为单链→引物与单链结合成互补序列→在DNA聚合酶作用下延伸→重复循环完成扩增(其他合理答案亦可)

(2)①高压蒸汽灭菌，在酒精灯火焰附近倒平板

②对照　培养基受到细菌污染

③培养基中接入了不同种类的细菌

不能，菌落的形态越多，只能说明接触的物体中细菌的种类越多，菌落数越多才能说明细菌数多

④防止培养基的温度过高使培养皿因受热不均而破裂 防止培养基温度过高杀死接种在其上的细菌(或微生物)　让细菌在适宜的温度下快速生长繁殖

(1)PCR的基本程序为三个环节：变性、复性、延伸。

(2)高压蒸汽灭菌和无菌区操作是无菌技术的基础操作，灭菌是否合格，通过空白培养基的培养可以对照说明。注意与问题联系，分析表格中的信息。