红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要由血红蛋白完成。血红蛋白的主要功能是携带O2。我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液为实验材料,来提取和分离血红蛋白,请回答下列有关问题:
(1)实验前取新鲜的血液,切记要在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。采血容器中预先加入柠檬酸钠的目的是________________________________________________。
(2)若离心速度过高和时间过长,结果会怎样?____________________________。
(3)商品凝胶是干燥的颗粒,使用前需直接放在洗脱液中膨胀。为了加速膨胀可以____________________________。这种方法不但节约时间,而且可以除去凝胶中可能带有的____________________________,排除胶粒内的________________________。
(4)往色谱柱中装填凝胶时,不得有气泡存在。气泡会______________________,降低分离效果。在凝胶色谱过程中,不能发生洗脱液流干,露出凝胶颗粒的情况,一旦发生这种情况,和凝胶柱中有气泡的情况一样,凝胶色谱柱需要____________________。
(5)在蛋白质分离过程中,仔细观察红色区带在洗脱过程中的情况。如果________________________,则说明色谱柱制作成功。
在线课程(1)防止血液的凝固
(2)离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀,得不到纯净的红细胞,影响后续血红蛋白的提取纯度
(3)将加入洗脱液的湿凝胶用沸水加热,逐渐升温至接近沸腾1~2 h 微生物 空气
(4)搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序 重装
(5)血红蛋白的红色区带狭窄、平整、均匀一致的移动(每空1分)