萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强,主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐热,在70℃环境中 15min后失活。根据它们的这种特性,可分别测定一种酶的催化效率。请协助完成“测定小麦种子中α-淀粉酶催化效率”的实验。
实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1cm)。
主要试剂及仪器:1mg/mL的标准麦芽糖溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、石英砂恒温水浴锅等。
实验步骤:
步骤一:制作麦芽糖标准液。取 7 支干净的具塞刻度试管,编号,按表加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热 2min,取出后按试管号顺序排列。
| 试剂 | 试管号 | ||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | |
| 麦芽糖标准液(mL) | 0 | 0.2 | 0.6 | 1.0 | 1.4 | 1.6 | 2.0 |
| 蒸馏水(mL) | 2.0 | ||||||
| 麦芽糖含量(mg) | 0 | 0.2 | 0.6 | 1.0 | 1.4 | 1.6 | 2.0 |
| 斐林试剂(mL) | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
步骤二:制备酶液。
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步骤三: 。
步骤四:另取四支试管,编号A、B、C、D,向A、B试管中各加5mL5%淀粉溶液,向C、D试管中分别加入2mL已经处理的酶溶液(忽略少量的麦芽糖)和蒸馏水,将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10min ,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温10min。
步骤五: 。
结果分析:将A试管中颜色与第①步中获得的麦芽糖标准进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出α—淀粉酶催化效率。
结果分析:(略)
分析上述步骤回答:
(1)步骤一的2~7试管中加入蒸馏水的量分别是 (单位mL)。
(2)步骤三的实验操作是_ 。
(3)步骤五的实验操作是 。
(4)实验中B试管所起的具体作用是 。
在线课程(1)1.8、1.4、1.0、0.6、0.4、0 (2分)
(2)将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃ 水浴中15min,取出后迅速冷却(2分)
(3)分别取A、B试管中反应溶液各2mL(1分) 向其中分别加入2mL斐林试剂(1分)
60℃水浴加热2min后,观察颜色变化 (1分)
(4)检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖(1分)