萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强,主要有α—淀粉酶和β—淀粉酶。α—淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β—淀粉酶不耐热,在70℃条件下15 min后失活。请根据下列实验回答:
(1)实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1 cm)。
主要试剂及仪器:麦芽糖(还原糖)标准液、质量分数为5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等。
(2)实验步骤:
步骤一:制作麦芽糖梯度液。取7支干净的具塞刻度试管,编号,按表加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热2 min,取出后按试管号顺序排列。
| 试剂 | 试管号 | ||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | |
| 麦芽糖标准液(mL) | 0 | 0.2 | 0.6 | 1.0 | 1.4 | 1.6 | 2.0 |
| 蒸馏水(mL) | 2.0 | 1.8 | 1.4 | 1.0 | X | Y | Z |
| 斐林试剂(mL) | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
步骤二:萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液。
步骤三:将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15 min,取出后迅速冷却。
步骤四:另取四支试管,编号A、B、C、D,向A、B试管中各加5 mL 质量分数为5%淀粉溶液,向C、D试管中分别加入2 mL已经处理的酶溶液(忽略其中含有的少量麦芽糖)和蒸馏水,将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10 min,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温10 min。
步骤五:取A、B试管中反应溶液各2 mL分别加入E、F试管,然后向E、F试管分别加入 ,观察颜色变化。
(3)结果分析:将E试管中颜色与步骤一获得的麦芽糖标准液进行比较,从而获得该试管中 ,并计算出 催化效率。
(4)相关问题:
①步骤一的5~7试管中加入蒸馏水的量(X\Y\Z)分别是 (单位mL)。
②实验中B试管所起的具体作用是 。
③若要测定另一种淀粉酶的活性,则需在步骤 进行改变。
在线课程(2)2 mL斐林试剂,60℃水浴加热2 min后
(3)麦芽糖浓度 α—淀粉酶
(4)①0.6 0.40 ②检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖 ③三