以下是探究“酸碱度对酵母菌酒精发酵酶促反应速率的影响”的实验。

实验用具：烧杯、注射器8支、带有橡皮塞抽去空气的试管4支、干酵母粉、蔗糖、配制好的pH分别为5 6 7 8的缓冲液。

实验步骤：①用开水配制10%蔗糖溶液100 mL，冷却到室温(25℃)后，加入4克干酵母粉，10 min后依次完成步骤②③④⑤，观察并记录。

实验记录：产生2 mL气体体积量(以针筒推柄上升的mL数为产气量，见下图)所需的时间如下表：

pH	5	6	7	8
时间(s)	8	7	6	7.5

（1）完成实验步骤：

②取4支试管，分别标上 1 2 3 4

③　 ，分别注入4支试管内。

④　 ，同时分别注入到上述4支试管内，并开始计时。

⑤　 。

（2）实验结论：　

。

（3）回答问题：

①实验过程中为什么要等到蔗糖溶液冷却后再加入干酵母粉？

　 。

②为什么要用注射器吸取溶液注入试管内？

　 。

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(1)③分别用注射器吸取不同pH的缓冲液各2 mL

④分别用4支注射器吸取含有酵母粉的蔗糖溶液各2 mL

⑤当观察到每支试管上的注射器针筒推柄上升了2 mL时，记录所需要的时间　

(2)酵母菌酒精发酵酶促反应速率受溶液酸碱度的影响，pH为7时，酶促反应速率快，随pH的减小或增大，酶促反应速率都会减慢　

(3)①防止酵母菌死亡和酶遇高温失活(或变性)　

②避免空气进入试管，使试管内保持无氧状态