通过基因工程的方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并获得成功表达。棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞中，借助天然的种胚系统，形成含有目的基因的种胚。请回答下列问题：

(1)下列所示的黏性末端是由________种限制性核酸内切酶作用产生的。

(2)利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因工程操作步骤中的第三步，即____________。获取目的基因时，如果基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以通过DNA合成仪用化学方法直接________________。

(3)该目的基因在导入受体细胞前需要与载体结合，目前经常使用的载体是__________________。

(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，采用的技术是______________；其次还要检测__________，方法同样是采用分子杂交技术；最后检测____________，方法是________杂交。

(5)人们对转基因生物安全性的关注，随着转基因成果的不断出现而与日俱增。有人认为转基因生物不会影响食物安全，你的观点呢？理由是什么？

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【解析】　(1)据图分析限制性核酸内切酶的识别序列为GAATT、CAATT、GTTAA、CTTAA这4种，而酶具有专一性，故需4种不同的限制性核酸内切酶。

(2)利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，相当于基因工程操作步骤中的第三步 ——“将目的基因导入受体细胞”。

(3)基因工程的操作工具中常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。

(4)目的基因的检测与鉴定相关方法为：通过分子杂交技术检测转基因生物的DNA是否插入了目的基因及目的基因是否转录出mRNA。

(5)本题具有开放性，但要注意理由与观点的一致性。

【答案】　(1)4

(2)将目的基因导入受体细胞　人工合成

(3)质粒(其他合理答案也可)

(4)DNA分子杂交技术　目的基因是否转录出了mRNA　目的基因是否翻译成蛋白质　抗原—抗体

(5)会影响食物安全。理由是：①担心出现滞后效应；②担心出现新的过敏原；③担心营养成分改变等。

不会影响食物安全。理由是：①多环节、严谨的安全性评价；②科学家的负责态度可防止过敏原出现；③至今未发现转基因食物影响健康的实例等。