下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要,请回答:
本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子,通过人工合成若干DNA片段拼接而成,并且在胰岛素COOH端加上KDEL内质网滞留序列,避免胰岛素在植物细胞中的降解。将该基因置于CaMV 35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中,在番茄的果实中表达人胰岛素。
(1)本专利是采用__________方法获得目的基因的。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同,但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同,原因是__________________________________。
要想在体外获得大量该目的基因的片段,可以采用____________技术。
(2)根据上述摘要,转基因操作时所用的载体是__________。构建的基因表达载体中不会含有__________(从下列选项中选择)。
①目的基因 ②CaMV 35S启动子
③果实专一性启动子2A12 ④引物
⑤标记基因 ⑥内含子滞留序列
⑦终止密码子 ⑧终止子
(3)如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用______________技术。该技术中使用的基因探针也可以用来检测__________。
在线课程【解析】 本题考查基因工程的知识。由题意可知,所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子,通过人工合成若干DNA片段拼接而成,所以本专利是采用人工合成方法获得目的基因的。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同,但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同,原因是密码子具有简并性,基因序列不同,蛋白质可以相同。基因表达载体组分比较多,主要是以下几个:目的基因、CaMV 35S启动子、果实专一性启动子2A 12 标记基因。如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用DNA分子杂交技术。该技术中使用的基因探针也可以用来检测目的基因是否转录出mRNA。
【答案】 (1)人工合成 密码子具有简并性,基因序列不同,蛋白质可以相同 PCR
(2)农杆菌的Ti质粒 ④⑥⑦
(3)DNA分子杂交 目的基因是否转录出mRNA