国家863计划项目“利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制各药用蛋白”取得重大进震。目前，已经成功获得经纯化的抗凝血酶III蛋白，达到国际先进水平。下面是制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程图：

(1)根据流程图分析，动物乳腺生物反应器主要利用了 技术(至少写2种)。

(2)要实现①超数排卵，应在崂山奶出羊A发情期的某一阶段用 处理，然后收集卵子。通过②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是 。

(3)过程④需将抗凝血酶III基因注入受精卵内，在显微镜下判断是否受精作用的标志是 。

(4)要使人的抗凝血酶III基因在山羊乳腺细胞中特异性表达，在⑤之前要提取囊胚期的 细胞，采用检测 技术对其 和 进行检测。

(5)若要一次获得多只完全相同的转基因崂山奶山羊D，⑤应采用 技术。

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（1）转基因 动物细胞培养 胚胎移植

（2）促性腺激素 精子未获能

（3）在卵黄膜和透明带的间隙观察到两个极体

（4）滋养层 DNA分子杂交 性别 是否含有目的基因

（5）胚胎分割

考查基因工程、胚胎工程有关的知识。

（1）从图解中可以看出，体外受精、胚胎移植、重组DNA技术，涉及到大技术手段有基因工程、胚胎工程和细胞培养技术等。

（2）体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等几个主要步骤，卵细胞的采集方法：用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。

（3）精子入卵后形成一个雄原核，与此同时，精子入卵后被激活的卵子完成减数第二次分裂，排出第二极体后形成雌原核，并在在卵黄膜和透明带的间隙观察到两个极体；

（4）要使人的抗凝血酶III基因在山羊乳腺细胞中特异性表达，在⑤之前要提取囊胚期的滋养层的细胞，目的基因的检测方法是DNA杂交技术，其次是检测目的基因是否转录出了mRNA。

（5）一次获得多只完全相同的转基因崂山奶山羊D，可用胚胎分割。