转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下图表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

(1)若要获得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割？________，说明理由_________ 。

要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒？________。

(2)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有________基因，作为标记基因。

(3)②、③阶段是否可使用同种培养基？________；理由是______ 。

(4)④阶段是否可使用不添加植物激素的培养基？________；理由是_______ 。

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【解析】　(1)由图示知抗病基因为目的基因，构建表达载体时必须保持目的基因的完整性即不受破坏，而图示的限制酶SmaⅠ则切割抗病基因的中段导致抗病基因被损坏，因此不能用此限制酶对抗病基因进行切割。

(2)表达载体构建时必须的一个构成是载体上应该有标记基因，以鉴定受体细胞是否导入了目的基因，由此可推出如果香蕉细胞导入了抗病基因，且导入的载体上含有抗卡那霉素，则此细胞置入含卡那霉素的培养基上才会正常生长。

(3)②阶段为愈伤组织，③阶段为胚状体或丛芽，当两个阶段培养基中生长素高于细胞分裂素时，主要诱导组织脱分化和根原基的形成；当两个阶段培养基中细胞分裂素高于生长素时，则主要诱导组织再分化和芽原基的形成。

(4)④为试管苗，此时发育形成的幼嫩的芽、根尖等产生生长素以促进根的生长。

【答案】　(1)不能　对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构　不能　(2)抗卡那霉素　(3)不能　2个阶段培养基中生长素与细胞分裂素的比值不同　(4)可以 因为芽能产生生长素促进根的生长