34、【生物选修1--生物技术实践】（8分）

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。

（1）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于___________________培养基；从物理状态上来说，Ⅱ号培养基属于固体培养基，配制时一般加入___________________作为凝固剂。

（2）进行①过程的目的是___________________；②过程所使用的接种方法是___________________法。

（3）Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是___________________；一般对配制的培养基采用___________________法灭菌。

（4）部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放___________________分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈；应挑出透明圈___________________（大或小）的菌落，接种到Ⅱ号培养基。

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【答案】

34.（每空1分，共8分)

（1）选择 琼脂 （2）稀释 稀释涂布平板

（3）先调节pH，后灭菌 高压蒸汽灭菌

（4）淀粉酶 大 稀释 单个菌落的筛选（或筛选）

【解析】本题综合考查了微生物的培养、分离、纯化的方法步骤，培养基的成分，常用的灭菌方法及其适用情况，酶发挥作用的适宜温度及温度与酶活性的关系等嫩荣，同时考查了学生的识图能力和分析问题的能力。由图中显示，在①前后试管中细菌数目减少，可推知此过程为稀释，②过程后使用划线法对细菌进行固体培养基培养，可推知此过程为分离纯化嗜热菌。由图示可知表示过程是嗜热菌分离纯化的过程，Ⅰ号培养基为选择培养基。在培养微生物的培养基中，碳源和氮源必不可少，所以除淀粉外还应加入硝酸铵。细菌芽孢是在极端环境中产生的，具有耐高温等特点，只有用高温高压，才能杀死细菌芽孢，防止培养基污染。在使用该酶时，应保证活性较高、酶的热稳定性较好的温度范围。