23．下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamH I或EcoR I或Pst I的酶切位真。现用Pst I和EcoR I两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是( )

A.1为EcoR I，2为BamH I，3为FcoR I，4为PstI

B.1为BamH I，2为EcoRI，3为EcoR I，4为Pst I

C.1为EcoRI，2为Pst， 3为Pst I，4为BamH I

D.1为BamHI，2为EcoRI，3为PstI，4为EcoRI

D