6.(12分)多聚半乳糖醛酸酶(PG),能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟中,PG合成显著增加,能使果实交红变软,但不利于保鲜,可利用基因工程的方法以其进行改造。请据图l回答:

提取目的基因
①若已获取PG的mRNA,可通过______获取PG基因。
②在该基因上游加结构A可确保基因的反义转录,结构A上应具有________酶结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端。已知BamHI的识别序列如图2-甲所示,请在图2-乙相应位置上,画出目的基因两侧的黏性末端。

③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是_____________________________________.
(2)用含目的基因的农秆菌感染番茄原生质体后,可用培养基进行筛选。培养24-48h后取样,在质量分数为25%的蔗糖溶液中,观察细胞__________现象来鉴别细胞壁是否再生。
(3)由于导入的目的基因能转录反义RNA,且能与_____________互补结合,抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄__________,则可确定转基因番茄成功。
(4)获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因,科研人员常采用__________技术手段使子代保持转基因的优良性状。
(5)改造过程需要的工具酶有_______________,如果在此过程中形成的是平末端,则起“缝合作用的酶是_________________________.
(6)在构建基因表达载体时,除了插入目的基因外,基因表达载体中还需含有___________,在该番茄薪品种的培育过程中,将目的基因导入受体细胞的方法叫做___________。
在线课程6.(1)①逆转录(或cDNA文库) ②RNA聚合酶 画图
③大量复制目的基因(克隆目的基因) (2)是否发生质壁分离 (3)天然PG基因转录的mRNA 长 (4)植物组织培养 (5)限制酶和DNA连接酶 T4DNA连接酶 (6)启动子、终止子、标记基因、复制原点 农杆菌转化法