44.（10分）探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段，可用于核酸分子杂交以检测目标核苷酸序列是否存在。下图一是某实验小组制备的两种探针，图二是探针与目的基因杂交的示意图。请回答下列有关问题：

（1）核酸探针与目标核苷酸序列间的分子杂交遵循__________。设计核苷酸序列是核酸探针技术关键步骤之一。图一所示的两种核酸探针（探针2只标注了部分碱基序列）都不合理，请分别说明理由__________、__________。

（2）cDNA探针是目前应用最为广泛的一种探针。制备cDNA探针时，首先需提取、分离获得__________作为模板，在__________的催化下合成cDNA探针。利用制备好的-珠蛋白基因的cDNA探针与-珠蛋白基因杂交后，出现了如图二中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构”，原因是____________________。

（3）基因工程中利用乳腺生物反应器生产-抗胰蛋白酶，应选用__________切割含有目的基因的DNA片段和载体，并用__________方法导入__________中，再利用SRY探针（Y染色体上的性别决定基因）进行检测，将检测反应呈__________（选填“阳”、“阴”）性的胚胎进行移植培养。

在线课程

44. 碱基互补配对原则 探针1碱基序列过短，特异性差 探针2自身折叠后会出现部分碱基互补配对而失效

（2）mRNA 逆转录酶 -珠蛋白基因中含有不表达序列（或内含子）

（3）同种限制酶 显微注射 受精卵 阴性