图甲乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Ne r表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是（）
| A．图甲中的质粒用BamHⅠ切割后，含有4个游离的磷酸基团 |
| B．在构建重组质粒时，可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA |
| C．用PstⅠ和Hind III酶切，加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒 |
| D．导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长 |
C
解析试题分析：质粒呈环状，用BamHⅠ切割后，得到的片段含有2个游离的磷酸基团；BamHⅠ切割外源DNA会将目的基因破坏，所以不能选用该限制酶切割；PstⅠ和Hind III双酶切，防止目的基因和质粒的任意拼接，加入DNA连接酶后只能得到1种符合要求的重组质粒；由于PstⅠ破坏了Ampr，所以重组质粒不能在含氨苄青霉素的培养基中生长。
考点：本题考查限制酶以及构成基因表达载体的知识。
点评：本题难度中等，要求学生理解DNA中游离磷酸基团的位置以及双酶切的含义。