下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是

A.1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠB.1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠC.1为PstⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为BamHⅠD.1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ在线课程A
试题分析：限制酶主要从原核生物中分离纯化出来。具有特异性，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。形成黏性末端和平末端两种。为了防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状，应选用的酶切位点是1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ。
考点：基因工程
点评：本题较简单，要求学生识记基因工程的相关知识，了解限制性内切酶的作用机理。