血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O₂和部分CO₂的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。

（1）将实验流程补充完整：A为________，B为________。凝胶色谱法的基本原理是根据________而达到蛋白质分离的有效方法。

（2）洗涤红细胞的目的是去除________，洗涤次数过少，无法除去；离心速度过高和时间过长会使____________一同沉淀。达不到分离的效果。洗涤干净的标志是________________。释放血红蛋白的过程中起作用的试剂是________________。

（3）在B过程中加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是__________________________________________________________________。如果红色区带________________，说明色谱柱制作成功

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（1）血红蛋白的释放 样品的加入和洗脱 相对分子质量的大小

（2）杂蛋白（血浆蛋白） 白细胞（等） 离心后上清液中没有黄色 蒸馏水和甲苯

（3）模拟生物体内的生理环境（保持体外pH和体内一致保持蛋白质的正常结构维持洗脱所需的压力等合理答案均可）均匀一致的移动

蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。样品处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放和分离血红蛋白溶液；通过透析对血红蛋白溶液进行粗分离，透析的原理是透析袋能使小分子自由进出而大分子则保留在袋内，从而除去分子量较小的杂质；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量魇杂质蛋白除去，从而对样品进一步纯合，最后SDS—聚丙烯酰凝胶电泳进行纯度鉴定。在B过程中加入物质的量浓度为20m mol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是模拟生物体内的生理环境（保持体外pH和体内一致、保持蛋白质的正常结构、维持洗脱所需的压力等合理答案均可）；如果红色区带均匀一致的移动
，说明色谱柱制作成功。