A.获得抗虫基因时不一定要使用限制性核酸内切酶B.抗虫基因进入受体细胞，棉花不一定会表现出抗虫性状C.Ti质粒上的标记基因用以筛选转基因抗虫棉幼苗D.构建重组质粒时，不一定用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒在线课程C
试题分析：获得抗虫基因可以采用逆转录法，在此过程中不需使用限制性核酸内切酶，A项正确；抗虫基因进入受体细胞，不一定能表达，故需要检测，B项正确；用以筛选转基因抗虫棉幼苗往往是根据棉花是否表现出抗虫性状，C项错误；构建重组质粒时，为防止自身环化现象的发生，往往用不同的限制酶切割目的基因和质粒，D项正确。
考点：