下列有关生物工程的叙述，不正确的有
①．基因工程的核心步骤是构建基因表达载体
②．蛋白质工程可通过直接改造蛋白质的结构从而改变其功能
③．克隆羊的培育涉及细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术
④．PCR技术需要利用限制性核酸内切酶打开DNA双链
⑤．利用核移植技术可以培育试管婴儿
⑥．牛胚胎发育的历程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体
⑦．利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体
⑧．利用植物茎尖培养脱毒苗时，需要对离体的茎尖、培养基等进行灭菌
A.一项B.两项C.三项D.四项在线课程D
试题分析：基因工程的核心步骤是构建基因表达载体，①正确；蛋白质工程也叫第二代基因工程，是通过基因改造或基因修饰来完成，②错误；克隆羊的培育首先将体细胞的细胞核移植到去核卵细胞内形成重组细胞，然后通过早期胚胎培养和胚胎移植等技术培育而成的， [③正确；PCR技术中利用了高温的方式打开了DNA双链，④错误；试管婴儿是利用了体外受精的方式获得婴儿的有性生殖，不需要用核移植技术，⑤错误；哺乳动物的胚胎发育过程均为：受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体，⑥正确；单克隆抗体的制备将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合，然后通过细胞培养的方法获得，⑦正确；植物的茎尖和根尖等分生区没有病毒，因此不需要灭菌处理，⑧错误。
考点：本题综合考查了基因工程、蛋白质工程、细胞工程和胚胎工程等相关知识，意在考查考生识记和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。