下列关于基因表达载体构建的相关叙述，不正确的是
A.需要限制酶和DNA连接酶B.必须在细胞内进行C.抗生素抗性基因可作为标记基因D.启动子位于目的基因的首端在线课程B
解析：
试题
分析：基因表达载体构建过程中需要限制酶和DNA连接酶两种工具酶的协助，A正确；
基因工程的操作是在体外条件下进行的，B错误；
抗生素抗性基因或荧光标记基因可作为标记基因，C正确；
基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因、标记基因，其中启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的末端，D正确。考点：本题考查了基因表达载体构建的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。