在比例a：0.25=4：b中，a和b一定互为倒数．正确
分析：根据比例的性质“两内项的积等于两外项的积”，可知在比例a：0.25=4：b中，ab=0.25×4，因为0.25×4=1，所以ab也等于1，再根据乘积是1的两个数互为倒数，进而确定a和b一定互为倒数；据此判断为正确．
解答：因为a：0.25=4：b，
所以ab=0.25×4=1，
所以a和b一定互为倒数；
故答案为：正确．
点评：此题考查比例性质的运用：在比例里，两外项的积等于两内项的积；也考查了倒数的意义：乘积是1的两个数互为倒数．